4.17 여시니아 엔테로콜리티카

가. 증균배양

검체 25 g 또는 25 mL를 취하여 PSBB 배지(배지 44TM2276) 225 mL을 가하고, 동시에 PSBB 배지를 가한 시험용액 10 mL를 취해 ITC 배지(배지 97TM1357) 90 mL에 가한다. 각각의 시험용액을 25±1℃에서 48시간 배양한다. 검체를 가하지 아니하고 동일한 방법으로 제조한 ITC 배지를 대조시험액으로 하여 시험조작의 무균여부를 확인한다.

나. 분리배양

각각의 증균배양액 0.1 mL를 0.5% KOH가 함유된 0.5% 식염수 1 mL에 가하여 수초간 섞는다. 이 용액을 MacConkey 한천배지(배지 30TMH110TM1898)와 CIN 한천배지(배지 45TM501)에 각각 접종하여 30±1℃ 에서 24±2시간 배양한다.

다. 확인시험

MacConkey 한천배지에서 유당을 비분해하는 집락이나 CIN 한천배지(배지 45TM501)에서 중심부가 짙은 적색을 보이는 집락을 골라 각각 TSI 사면배지(배지 32TM424)의 사면과 고층부에 접종하여, 35～37℃에서 18～24 시간 배양 후 고층부와 사면이 노랗고 가스와 황화수소가 발생하지 않은 균주를 선택하여 25℃, 37℃에서 운동성 시험 및 urea, citrate시험 등을 한다. 이 때 여시니아 엔테로콜리티카는 37℃에서는 운동성을 나타내지 않고 25℃에서 운동성을 가지는 특성이 있다. 또한 urea시험 양성, citrate시험 음성이며 그람음성 간균일 때 양성으로 판정한다.