다) 황색포도상구균 시험

(1) 검액의 조제 및 조작 : 검체 1 g 또는 1 mL를 달아 카제인대두소화액체배 지TMH102를 사용하여 10 mL로 하고 30∼35 ℃에서 24∼48시간 증균 배양한다. 증균배양액을 보겔존슨한천배지TM1722TM395 또는 베어드파카한천배지TM358TMH119에 이식하여 30 ∼35 ℃에서 24시간 배양하여 균의 집락이 검정색이고 집락주위에 황색투 명대가 형성되며 그람염색법에 따라 염색하여 검경한 결과 그람 양성균으 로 나타나면 응고효소시험을 실시한다. 응고효소시험 음성인 경우 황색포도상구균 음성으로 판정하고, 양성인 경우에는 황색포도상구균 양성으로 의심하고 동정시험으로 확인한다.

(2) 배지

보겔존슨한천배지TM1722TM395(Vogel-Johnson agar)

카제인의 판크레아틴 소화물

10.0 g

효모엑스

5.0 g

만니톨

10.0 g

인산일수소칼륨

5.0 g

염화리튬

5.0 g

글리신

10.0 g

페놀렛

25.0 mg

한천

16.0 g

정제수

1000 mL

이상을 달아 1분동안 가열하여 자주 흔들어 준다. 121 ℃에서 15분간 고압멸균하고 45∼50 ℃로 냉각시킨다. 멸균 후 pH가 7.2 ± 0.2가 되도록 조정하고 멸균한 1 %(w/v) 텔루린산칼륨 20 mL를 넣는다.

베어드파카한천배지TM358TMH119(Baird-Parker agar)

카제인제 펩톤

10.0 g

육엑스

5.0 g

효모엑스

1.0 g

염화리튬

5.0 g

글리신

12.0 g

피루브산나트륨

10.0 g

한천

20.0 g

정제수

950 mL

이상을 섞어 때때로 세게 흔들며 섞으면서 가열하고 1분간 끓인다. 121 ℃에서 15 분간 고압멸균하고 45∼50 ℃로 냉각시킨다. 멸균한 다음의 pH가 7.2 ± 0.2가 되도록 조정한다. 여기에 멸균한 아텔루산칼륨용액 1 %(w/v) 10 mL와 난황유탁액 50 mL를 넣고 가만히 섞은 다음 페트리접시에 붓는다. 난황유탁액은 난황 약 30 %, 생리식염액 약 70 %의 비율로 섞어 만든다.

라) 배지성능 및 시험법 적합성시험

검체의 유ㆍ무 하에서 각각 규정된 특정세균시험법에 따라 제조된 검액ㆍ대조액에 표 3.에 기재된 시험균주 100cfu를 개별적으로 접종하여 시험할 때 접종 균 각각에 대하여 양성으로 나타나야 한다. 증식이 저해되는 경우 항균활성을 중화하기 위하여 희석 및 중화제(2)-라)항의 표2.)를 사용할 수 있다.

표3. 특정세균 배지성능시험용 균주