TM1866
*B12 ASSAY AGAR (using L.leichmannii)
시험균 Lactobacillus leichmannii를 이용한 Vitamin B12의 미생물학적 역가 시험용
개요
락토바실러스(Lactobacillus) 종은 비선택적 배지에서 잘 자라지 않으며, 성장에 필요한 특수한 영양분을 필요로 합니다. 비타민 정량 분석 배지는 비타민의 미생물학적 분석에 사용하기 위해 제조됩니다. 비타민의 미생물학적 분석에 사용되는 배지는 크게 세 가지 유형이 있습니다.
조성Composition
| 성분 | g / L |
|---|---|
| Acicase, vitamin free | 15.000 |
| Dextrose (Glucose) | 40.000 |
| Asparagine | 0.200 |
| Sodium acetate | 20.000 |
| Ascorbic acid | 4.000 |
| L-Cystine | 0.400 |
| DL-Tryptophan | 0.400 |
| Adenine sulphate | 0.020 |
| Uracil | 0.020 |
| Xanthine (Sodium) | 0.020 |
| Riboflavin (Vitamin B2) | 0.001 |
| Thiamine hydrochloride | 0.001 |
| Biotin | 0.00001 |
| Niacin | 0.002 |
| p-Amino benzoic acid (PABA) | 0.002 |
| Calcium pantothenate | 0.001 |
| Pyridoxine hydrochloride | 0.004 |
| Pyridoxal hydrochloride | 0.004 |
| Pyridoxamine hydrochloride | 0.0008 |
| Folic acid | 0.0002 |
| Monopotassium phosphate | 1.000 |
| Dipotassium phosphate | 1.000 |
| Magnesium sulphate | 0.400 |
| Sodium chloride | 0.020 |
| Ferrous sulphate | 0.020 |
| Manganese sulphate | 0.020 |
| Polysorbate | 80 |
| Guanine hydrochloride | 0.020 |
| 합계 | 162.556 |
조제 방법
- 8.45 g을 정제수 또는 증류수 100 mL에 녹인다.
- 필요하면 가열하여 배지를 완전히 녹인다.
- 약간의 침전물이 고르게 분포되도록 잘 섞는다.
- 시험을 위해 각 시험관(표준물질 또는 미지 시료를 증량하여 함유)에 배지 5 mL를 분주한다.
- 시험관당 총 용량 10 mL는 증류수를 첨가하여 맞춘다.
- 15 psi(121°C)에서 5분간 고압증기멸균한다.
- 배지를 즉시 식힌다.
- 일반적으로 시험관당(10 mL) Vitamin B12(Cyanocobalamin) 0, 0.025, 0.05, 0.075, 0.1, 0.125, 0.15, 0.2 ng 수준에서 만족스러운 결과가 얻어진다.
품질 관리Quality control
- 분말 외관
- 크림색~노란색의 균질한 분말로, 부드러운 덩어리를 형성하는 경향이 있으며 쉽게 부서져 분말 형태가 됨
- 조제 후 외관
- 약간의 침전이 있을 수 있는 연한 호박색의 투명한 용액
- pH (25°C)
- 6.1±0.2
품질 확인 균주 (배양 결과)
| 균주 | ATCC | 접종량 (CFU/mL) | 성장 | 배양 온도 | 배양 시간 |
|---|---|---|---|---|---|
| Lactobacillus leichmannii | 7830 | 50-100 | USP Cyanocobalamin 기준 표준물질 농도가 증가함에 따라 (assay 튜브당 0.0, 0.025, 0.050, 0.075, 0.1, 0.125, 0.150, 0.2 ng) 생육이 점진적으로 증가하며, 620nm에서 흡광도의 동등한 증가로 기록됨 | 35-37°C | 18-24시간 |
보관
건조 분말은 흡습성이 있으므로 2~8°C의 건조한 곳에 용기를 단단히 밀봉하여 보관하고 직사광선을 피한다. 적정 조건에서 유효기간은 4년이다. 용기를 처음 열 때 라벨의 기재란에 개봉 일시를 적고, 필요한 양을 덜어낸 뒤에는 흡습을 막기 위해 뚜껑을 꼭 닫는다.
자료Documents
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