TM590
MIDDLEBROOK 7H9 AGAR BASE
Mycobacterium tuberculosis의 분리, 배양 및 감수성 시험용
개요
결핵균 배양용 고체 배지는 계란 기반(로웬스타인 젠슨 배지) 또는 한천 기반(미들브룩 배지)일 수 있습니다. 듀보스와 미들브룩은 올레산과 알부민을 함유한 다양한 제형을 개발했는데, 이는 결핵균을 독성 물질로부터 보호하여 결핵균의 성장을 돕습니다. 미들브룩과 콘이 개발한 미들브룩 7H9 한천 배지는 결핵균 배양에 사용됩니다.
조성Composition
| 성분 | g / L |
|---|---|
| Ammonium sulphate | 0.500 |
| Sodium glutamate | 0.500 |
| Sodium citrate | 0.100 |
| Pyridoxine | 0.001 |
| Biotin | 0.0005 |
| Disodium phosphate | 2.500 |
| Monopotassium phosphate | 1.000 |
| Ferric ammonium citrate | 0.040 |
| Magnesium sulphate | 0.050 |
| Calcium chloride | 0.0005 |
| Zinc sulphate | 0.001 |
| Copper sulphate | 0.001 |
| Malachite green | 0.001 |
| Agar | 15.000 |
| 합계 | 19.695 |
조제 방법
- 9.85 g을 증류수 450 mL에 녹인다. 필요하면 glycerol 1 mL를 첨가할 수 있다.
- 끓을 때까지 가열하여 배지를 완전히 녹인다.
- 15 psi(121°C)에서 15분간 고압증기멸균한다.
- 45~50°C로 식힌 후 Middlebrook OADC Growth Supplement 1바이알을 무균적으로 첨가한다.
- 잘 섞어 필요한 만큼 분주한다.
품질 관리Quality control
- 분말 외관
- 연한 노란색~연한 녹색의 균질한 자유 유동 분말
- 조제 후 외관
- 페트리 접시에서 녹색을 띤 연한 호박색의 투명~약간 유백색 겔을 형성
- pH (25°C)
- 6.6±0.2
품질 확인 균주 (배양 결과)
| 균주 | ATCC | 접종량 (CFU/mL) | 성장 | 회수율 | 배양 온도 | 배양 시간 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Mycobacterium tuberculosis | 25618 | 50-100 | 양호~왕성 | ≥50% | 35-37°C | 2~4주 |
| Mycobacterium fortuitum | 6841 | 50-100 | 양호~왕성 | ≥50% | 35-37°C | 2~4주 |
| Mycobacterium smegmatis | 14468 | 50-100 | 양호~왕성 | ≥50% | 35-37°C | 2~4주 |
보관
건조 분말은 흡습성이 있으므로 25~30°C의 건조한 곳에 용기를 단단히 밀봉하여 보관하고 직사광선을 피한다. 적정 조건에서 유효기간은 4년이다. 용기를 처음 열 때 라벨의 기재란에 개봉 일시를 적고, 필요한 양을 덜어낸 뒤에는 흡습을 막기 위해 뚜껑을 꼭 닫는다.
자료Documents
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