LEGIONELLA AGAR BASE W/O CHARCOAL

초기에 F-G 한천으로 불렸던 레지오넬라 한천은 Feely 등이 전분을 숯으로, 카제인 가수분해물을 효모 추출물로 대체하여 레지오넬라 뉴모필라의 회수율을 향상시킨 변형 배지입니다. Pasculle 등은 ACES(N-2-아세트아미도-2-아미노에탄설폰산) 완충액을 첨가하면 배지의 영양가가 향상된다고 보고했습니다. Edelstein은 이 배지의 민감도를 높이기 위해 α-케토글루타르산을 첨가할 것을 제안했습니다.

1. 12.5 g을 정제수 또는 증류수 430 mL에 녹인다.
2. 끓을 때까지 가열하여 배지를 완전히 녹인다.
3. 15 psi(121°C)에서 15분간 고압증기멸균한다.
4. 45~50°C로 식힌다.
5. Legionella agar용 Sterile Charcoal Supplement 1바이알을 재수화한 내용물과 Legionella Growth Supplement (BCYE) 50 mL가 든 1바이알을 무균적으로 첨가한다.
6. 선택 supplement를 첨가하지 않는 경우 멸균 증류수 10 mL를 무균적으로 첨가하여 부피를 500 mL로 맞춘다.
7. 활성탄 입자가 가라앉지 않도록 잘 섞어 멸균 페트리 접시에 붓는다.
8. 필요하면 Legionella BMPA Selective Supplement 또는 Legionella (GVPC) 1바이알을 재수화하여 무균적으로 첨가함으로써 배지를 선택배지로 만들 수 있다.
9. Selective Supplement 또는 Legionella Selective Supplement (GVPN)를 Legionella Growth Supplement (BCYE) 1바이알 및 Sterile Charcoal powder와 함께 멸균 용융 후 식힌 Legionella Agar Base 430 mL에 첨가한다.
10. 동시에 L-Cysteine이 없는 배지는 Legionella Growth Supplement w/o L-Cysteine 1바이알의 내용물을 무균적으로 첨가하여 조제할 수 있다.

분말 외관

크림색~노란색의 균질한 자유 유동 분말

조제 후 외관

Sterile Charcoal Supplement 첨가 후: 페트리 접시에서 검은색의 불투명 겔을 형성

pH (25°C)

6.9±0.2

품질 확인 균주 (배양 결과)

보관

건조 분말은 흡습성이 있으므로 25~30°C의 건조한 곳에 용기를 단단히 밀봉하여 보관하고 직사광선을 피한다. 적정 조건에서 유효기간은 4년이다. 용기를 처음 열 때 라벨의 기재란에 개봉 일시를 적고, 필요한 양을 덜어낸 뒤에는 흡습을 막기 위해 뚜껑을 꼭 닫는다.